Il Laboratorio di Neuroscienze si propone di fornire agli studenti una conoscenza di base di alcuni dei paradigmi sperimentali e dei metodi di studio comunemente utilizzati in ambito neurobiologico. Obiettivo del primo modulo è di fornire conoscenze e competenze sull’approccio neuromorfologico, per lo studio di modelli in vivo e in vitro di neurosviluppo e di neurodegenerazione.
Verranno fornite le basi metodologiche per la preparazione di campioni neuroanatomici e di colture neuronali per la microscopia ottica, confocale ed elettronica. Lo studente acquisirà competenze avanzate riguardo all’osservazione e alla valutazione quantitativa di campioni trattati con tecniche di immunoistochimica ed immunofluorescenza.
Verranno fornite le basi metodologiche per la preparazione di campioni neuroanatomici e di colture neuronali per la microscopia ottica, confocale ed elettronica. Lo studente acquisirà competenze avanzate riguardo all’osservazione e alla valutazione quantitativa di campioni trattati con tecniche di immunoistochimica ed immunofluorescenza.
scheda docente
materiale didattico
Programma
Cenni di sviluppo del sistema nervoso di mammifero. Neuroanatomia ed istologia del sistema nervoso: organizzazione del sistema nervoso centrale (SNC) e periferico (SNP). Neuroni: sottotipi neuronali e loro distribuzione. Cellule gliali: astrociti, oligodendrociti, microglia. Citoarchitettura di alcune aree del SNC: corteccia cerebrale, gangli della base, ippocampo, sostanza nera, cervelletto e midollo spinale. Neuropatologia umana: malattie del neurosviluppo e patologie neurodegenerative. Modelli in vivo e in vitro per lo studio morfologico di neuropatologie umane: modelli murini transgenici e cellule staminali pluripotenti indotte (IPSC). Osservazione macroscopica e manipolazione di campioni murini neuroanatomici (encefalo, midollo spinale). Allestimento dei campioni di cervello murino normale e patologico per analisi immunoistochimica, con uso di marcatori neuronali e gliali. Osservazione al microscopio ottico e caratterizzazione del fenotipo morfologico di sezioni di cervello murino normale e patologico. Applicazione di tecniche morfologiche (per es., immunofluorescenza) allo studio di iPSC e di motoneuroni da esse derivate, utilizzando marcatori per il riconoscimento di organuli specifici (mitocondri, perossisomi). Osservazione ed analisi quantitativa al microscopio confocale. Allestimento di campioni di modelli neuropatologici (in vivo e in vitro) per l’esame ultrastrutturale e osservazione al microscopio elettronico (SEM, FIB/SEM).Testi Adottati
Articoli scientifici, slide delle lezioni ed altro materiale didattico utile verranno forniti dopo ogni lezione/esercitazione.Modalità Erogazione
Lezioni teoriche e pratiche frontali. Seminari specialistici ed approfondimento di specifiche tecniche in gruppi.Modalità Frequenza
Obbligatoria.Modalità Valutazione
Sarà valutato il livello di conoscenze e di competenze acquisite. Verrà inoltre valutata la capacità critica nell'esame di letteratura su argomenti metodologici inerenti alla materia.